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菲羅門與ACE色譜柱的保養方法
點擊次數:75 發布時間:2019-05-22

外科手术器械打结

色譜柱是一種消耗品,因此使用壽命有限。

對于大多數應用,色譜柱應持續進行500-2000次注射(進樣),但這會因樣品的清潔度、流動相的pH值和保護柱卡套的使用(是否使用保護柱)而不同。

這里列出的做法有助于最大限度地提高硅基(硅膠基質)色譜柱的使用壽命。

 

一、神经外科手术器械 英文:當從一個流動相更換為另一個流動相時,或者在回收梯度(梯度循環)時,應需要10-20個柱體積。

下表顯示了各種色譜柱尺寸(規格)的色譜柱體積。

如果溶劑的變化不太劇烈(例如80%至20%的ACN/水與ACN至THF(與之相對的由ACN至THF)),則需要的體積較少。

檢查平衡最簡單方法是進行兩次樣品注射。

如果保留相同,則色譜柱充分平衡;如果保留變化,應增加平衡體積并重新試驗。平衡與溶劑的體積有關,與時間無關網上棋牌。

所以較高的流量(流速)可以減少平衡時間。

 

心胸外科手术器械是几类

色譜柱直徑

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腹腔镜泌尿外科手术器械

德国神经外科手术器械

2.1 mm

0.1

0.3

0.5

3.2 mm

0.3

0.7

1.2

4.6 mm

0.5

1.5

2.5

10.0 mm

2.4

7.1

11.8

21.2 mm

11.6

34.7

57.8

 

 

 

 

 

 

 

二、色譜柱沖洗是一個簡單的過程,可以通過清洗色譜柱中的頑固(保留較強的)物質來延長色譜柱的壽命。

每天結束色譜柱的使用時,應除去一切緩沖液(應除去色譜柱中的緩沖鹽),然后用100%強溶劑(通常為ACN或MeOH,采用反相方法)沖洗色譜柱。

下一頁列出的詳細沖洗程序可以有效恢復色譜柱的性能,但應牢記:色譜柱是一種消耗品,因此請勿期望它能夠永遠的持續使用!

避免用100%的水沖洗反相色譜柱(嵌入極性基團或“AQ”色譜柱除外),因為相(固定相)去濕會影響清洗效果,而且流動相色譜柱的重新平衡會非常緩慢。

對于您的色譜柱,請按照以下所述的一般步驟,使用特定溶劑進行色譜柱沖洗。

應在沖洗之前查看制造商的建議(生產商說明書),以免損壞色譜柱。
1. 拆掉并翻轉色譜柱(拆下色譜并反接)
2. 將色譜柱連接到泵上,而非檢測器(不接檢測器)
3. 用10-20個柱體積的溶劑進行沖洗,且流速不得高于QC色譜圖的流速
4. 如果改變以下步驟,應確保在每個連續步驟中使用可混溶溶劑(溶劑可互溶)

 

反相色譜柱(C18,C8,C4,苯基,CN,'AQ'型)
a. 流動相無緩沖液
b. MeOH或ACN

如果金屬離子被認為是污染的致因,應使用0.05M EDTA水溶液沖洗,然后用水沖洗,并按上述順序沖洗。使用離子對試劑的色譜柱應專門用于離子對的應用之中。

 

未鍵合的硅膠柱(SIL)
a. IPA
b. MeOH
c. 乙酸乙酯

 

鍵合正相柱(CN、NH 2、二醇)
a. 三氯甲烷
b. IPA
c. 二氯甲烷
d. 己烷

 

陰離子交換柱(SAX,WAX)
a. 水
b. 甲醇
c. 三氯甲烷
d. 甲醇
e. 水

 

陽離子交換柱(SCX,WCX)
a. 水(沖洗時注入4x200L的DMSO)
b. THF

 

蛋白質的體積排阻柱
對于弱保留的蛋白質
a. 0.1M磷酸鹽緩沖液,pH為3
對于強保留的蛋白質
a. 100%水至100%ACN的梯度,運行60分鐘

 

三、色譜柱的合理存放有助于延長柱的使用壽命。

最簡單的存放步驟為:從柱中除去一切緩沖液,然后用10-20個柱體積的強流動相溶劑(例如用于反相的MeOH或ACN)清洗柱,以除去柱中的頑固(強保留)物質。

然后用制造商指定的存儲流動相,以10-20個柱體積的容量沖洗色譜柱(該信息應隨色譜柱提供,并在QC檢測色譜圖中進行詳細的說明)。

最后,安全地蓋上柱帽(擰緊堵頭),以防流動相蒸發。
除了色譜柱制造商明確建議的特定情況(例如一些離子交換柱)外,請勿使用緩沖液或者少于約25%的有機溶劑來用于儲色譜柱存儲,因為它們會導致微生物的滋生。(保存色譜柱,以防微生物的滋生)

 

• 每個新項目應使用一種全新的B型高純度硅膠柱,并與最高質量的HPLC級試劑結合使用。
• 定期沖洗HPLC系統,去除鹽和緩沖液,并定期保養系統,從而最大限度地減少止回閥(單向閥)和泵密封(密封圈)問題。

樣本清理過程越徹底,樣本就越干凈;同時,與樣本相關的問題發生概率就越小。

• 完成一系列(系統多次)運行(或在某些情況下,每次運行后)后,應使用強溶劑沖洗,這樣有助于除去柱中的頑固殘留(吸附較強的)物質,并將未來運行中的干擾降至最低(盡量減少對以后的測試的干擾),延長色譜柱的使用壽命。
色譜柱不能永遠使用,但良好維護可減少不必要的更換支出

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